重组腺病毒8大优点

1 、宿主范围广,对人致病性低这套腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。 腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋 白。 2、 在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因 逆转录病毒只能感染增殖性细胞,因此 DNA 转 染不能在非增殖细胞中进行,而必须使细胞处于持续培养状态。腺病毒则能感染几乎所有的细 胞类型,除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞。腺病毒是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳 系统,它可以将转化细胞和原代细胞中得到的结果直接进行对比。
1 、宿主范围广,对人致病性低这套腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。 腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋 白。

2、 在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因 逆转录病毒只能感染增殖性细胞,因此 DNA 转 染不能在非增殖细胞中进行,而必须使细胞处于持续培养状态。腺病毒则能感染几乎所有的细 胞类型,除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞。腺病毒是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳 系统,它可以将转化细胞和原代细胞中得到的结果直接进行对比。

3 、 能有效进行增殖,滴度高这套腺病毒系统可产生 1010~1012 PFU/mL 这一特点使它非常适用于基因治疗。
 


4 、无需辅助病毒,可容纳 6kb 外源 DNA 为提供克隆空间,此腺病毒缺失了 E1 和 E3 早期 区。此外,此腺病毒可包装比非重组腺病毒 DNA 稍大的 DNA 分子。这些特点允许插入腺病 毒的基因或多基因表达盒可达 6 kb。

5 、与人类基因同源 该腺病毒载体系统应用了人类病毒作为载体,以人类细胞作为宿主,因此为人类蛋白进行准确的翻译后加工和适当的折叠提供了一个理想的环境。大多数人类蛋白都 可达到高水平表达并且具有完全的功能。

6 、不整合到染色体中,无插入致突变性 逆转录病毒可随机整合到宿主染色体,导致基因失 活或激活癌基因。而腺病毒则除了卵细胞以外几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中,因 此不会干扰其它的宿主基因。在卵细胞中整合单拷贝病毒是产生具有特定特征的转基因动物的 较好的系统。

7 、能在悬浮培养液中扩增 293A 细胞可以适应悬浮培养,这一调整可使病毒大量扩增。大 量事实证明悬浮 293A 细胞可在 1~20 L 的生物反应器中表达重组蛋白。

8 、能同时表达多个基因 这是第一个可以在同一细胞株或组织中用来设计表达多个基因的 表达系统。最简单的方法是将含有两个基因的双表达盒插入腺病毒转移载体中或者用不同的重 组病毒共转染目的细胞株来分别表达一个蛋白。测定不同重组病毒的 MOI 比值可正确估计各 重组蛋白的相对共表达情况。

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  • 发表于 2018-11-22 13:43
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  • 分类:其他组学

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